2.2.1 不同消毒方式对花葶消毒的影响
将采集的姬玉露多肉的带有多个花蕾的花葶，在加了吐温-20，2～3滴的溶液中，用软毛刷轻轻刷洗，要仔细清洗花葶的每个部位，放在流动的自来水下冲洗30min，然后在超净工作台里进行表面消毒处理。用0.1%升汞消毒5min、8min、10min、12min，用无菌水冲洗外植体3-4次，每次1min，对比消毒效果。接种时在花葶上部有花蕾的部分切取带有1～2个花蕾的花葶将其垂直插在培养基中进行培养。接种7天后观察并记录花葶生长状态，并统计计算出不同消毒方法的污染率、死亡率、存活率。
2.2.2不同基本培养基对花葶丛生芽诱导的影响
以花葶为外植体，接种在激素组合为6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的培养基中。在MS，1/2MS，WPS，B5四种培养基中，筛选最适宜的基本培养基，接种后第15天开始进行观察记录外植体的生长状况。
2.2.3不同种类和浓度激素对花葶丛生芽诱导的影响
在筛选出的最适宜基本培养基上，附加不同浓度NAA和6-BA；不同浓度6-BA和IBA（见表1）。接种7d后记录花葶的生长状态的变化，统计不同培养基中丛生芽的生长情况，进行激素种类及浓度的筛选。
2.2.4不同种类和浓度激素对花葶丛生芽增殖的影响
将诱导出的花葶丛生芽，切成单芽，垂直插在培养基里。在所筛选的基本培养基上附加不同浓度6-BA（0.5、1、1.5、2.0）mg/L分别与NAA（0.1、0.3、0.5、1.0）mg/L和IBA（0.1、0.3、0.5、1.0）mg/L组合；不同浓度KT（0.5、1、1.5、2.0）mg/L分别与NAA（0.1、0.3、0.5、1.0）mg/L和IBA（0.1、0.3、0.5、1.0）mg/L组合，进行激素组合的筛选。
2.2.5不同消毒方式对叶片表面消毒的影响
将采集的姬玉露多肉的成熟叶片，加吐温-20，2～3滴，在溶液中，用软毛刷轻轻刷洗，要仔细清洗叶的每个部位，放在流动的自来水下冲洗30min，然后在超净工作台里进行表面消毒处理（见表2）。
如表1所示，编号1～编号4都是用不同种类、浓度和不同时间的消毒剂，进行消毒处理，在消毒过程中要不断轻轻晃动消毒瓶。编号5～编号8都是先用5%NaClO溶液消毒2min，用无菌水冲洗3次；然后将叶片放在添加2滴吐温-20的相同浓度升汞溶液进行不同消毒时间的对比试验，最后用无菌水冲洗3-4次，使附着在叶片表面的升汞溶液彻底冲洗掉，以免升汞残留造成外植体初代培养死亡。叶片消毒完成后，将其置于灭菌过的滤纸上，将表面水分吸干，用手术刀将叶片按上中下切分为三部分，接种在培养基中进行培养。接种20d后观察并记录叶片的变化，并统计不同消毒方法的污染率、存活率、死亡率。
2.2.6不同种类与浓度激素组合对叶片愈伤组织诱导的影响
叶片诱导愈伤组织试验，基本培养基选用的是MS。在MS培养基里，再附加不同种类及浓度激素（见表3）。激素筛选的方法是单因子试验方法。附加不同浓度的6-BA与NAA、KT与NAA，6-BA与2,4-D、KT与2,4-D。将切好的叶片平放在培养基中，放在培养箱中暗培养24小时。将叶片接入培养基10d后统计愈伤组织诱导率、愈伤组织形态及长势，每隔5d，统计一次数据。
2.2.7不同种类与浓度激素组合对叶片愈伤组织分化的影响
愈伤分化试验以MS为基本培养基，添加不同浓度组合的6-BA（0.5、1.0、2.0）mg/L与NAA（0.5、1.0、1.5）mg/L、6-BA（（0.5、1.0、2.0）mg/L与IAA（0.5、1.0、1.5）mg/L、KT（0.5、1.0、2.0）mg/L与NAA（0.5、1.0、1.5）mg/L、KT（0.5、1.0、2.0）mg/L与IAA（0.5、1.0、1.5）mg/L，将接种后的培养基放在培养箱里暗培养，接种15d后，统计愈伤组织不定芽诱导率、不定芽长势和形态。
2.2.8壮苗培养壮苗试验采用的基本培养基为
MS，将愈伤组织上分化出的不定芽，切为4～5个芽一丛的小块，把芽丛接种到单独附加不同浓度NAA（0.2、0.5、0.8、1.5）mg/L、IBA（0.2、0.5、0.8、1.5）mg/L、IAA（0.2、0.5、0.8、1.5）mg/L的培养基中进行壮苗试验。2.2.9生根培养生根试验所用的基本培养基为1/2MS、WPM，切取生长健壮的不定芽，接入添加不同浓度NAA（0.5、1.0、1.5、2.0）mg/L，IBA（0.5、1.0、1.5、2.0）mg/L的培养基中进行生根试验。
2.2.10不同基质对组培苗移栽生长的影响
挑选根数多且健壮的再生植株进行炼苗，将装有组培苗的瓶，放在温室大棚里10~20天，遮阴度宜为50~70%。然后把瓶盖打开，放置3~7天注意遮阴，避免阳光直晒。将组培苗在瓶中取出，用流水把其根部的琼脂冲洗干净，最后植入经过消毒的不同基质（赤玉土：蛭石：泥炭土=3：1：1、赤玉土：蛭石：泥炭土=2：2：1、赤玉土：蛭石：泥炭土=1：1：3、赤玉土：蛭石：泥炭土=2：1：2）中，移出的试管苗一般在炼苗前4周遮阴要50%~90%，并采用喷雾洒水保持一定的湿度（85%左右），之后逐渐降低湿度和增强光照。2个月后统计移栽成活率。
2.2.11数据分析
本试验主要记录及分析的数据包括：污染率=(污染的外植体总数/接种数)×100%
