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不同基质对盆栽薰衣草生理指标的影响

   日期:2020-04-22 19:18:46      浏览:13    
核心提示:本试验所选用的品种为狭叶薰衣草和羽叶薰衣草两种。均选取每盆中长势最旺盛、无病虫害侵害的部位叶片来进行试验。
不同基质对盆栽薰衣草生理指标的影响
 
1  材料和方法 
 
1.1  材料 
 
本试验所选用的品种为狭叶薰衣草和羽叶薰衣草两种。均选取每盆中长势最旺盛、无病虫害侵害的部位叶片来进行试验。 


  
1.2  光合特性指标测定方法 
 
试验使用采用美国 Li-COR 公司生产的 Li-6400 在连续的晴天上午 9:00 -11:00 中进行,在完全自然条件下采用 Li-6400-02B 红蓝光源进行测定,开放式气路,气体流速控制 为 500μmol·s-1 , 叶 室 控 制 温 度 为 大 气 温 度 ( 28 ℃ -32 ℃ ), 光 合 有 效 辐 射PAR=1200μmol·m-2·s-1,选取试验处理的薰衣草每株苗木新梢以下的第 3 片完全展开的功能叶为光合特性测样对象,每个叶片重复测 3 次,每个处理测量 3-5 株,取平均值。测定指标包括净光合速率(Pn,μmol CO2·m2·s-1)、蒸腾速率(Tr,mmol H2O·m-2·s-1)、气孔导度(Gs,mol CO2·m-2·s-1)和细胞间隙 CO2 浓度(Ci,μmol·mol-1),并计算瞬时水分利用率(WUE,mmol·mol-1),计算公式为:WUE=Pn/Tr  。 
 
由于薰衣草叶片形状不规则,在测量中需将测量后的叶片单独剪下,利用Auto CAD2011 计算叶面积,在重新导入叶面积数据计算。 
 
1.3  叶绿素含量测定方法 
 
采用 SPAD502 叶绿素仪测定薰衣草叶片叶绿素含量,每株植物取 10 个叶片测量,每个处理重复测 3 株。 

 
 
1.4  可溶性糖含量测定方法
 
使用苏州科铭生物技术有限公司提供的植物可溶性糖含量试剂盒,用微量法测定薰衣草叶片可溶性糖含量,使用仪器为离心机、可见分光光度计、水浴锅。
 
可溶性糖的提取:称取 0.1g 薰衣草叶片样品,加入 1m L 蒸馏水研磨成匀浆,倒入有盖离心管中,95℃水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心10min,取上清液于 10ml 试管中,用蒸馏水定容至 10m L,摇匀备用。 
 
样品的测定: 
 
(1)工作液的配制:在试剂一中加入 2.5m L 试剂二,充分溶解后使用。 
 
(2)加样表(在 EP 管中反应) 
 
混匀,置 95 度水浴中 10min,冷却至室温后,取 200μL 转移至微量石英比色皿中,与 620nm 处,分别读取空白值和测定管吸光值,△A=A 测定管-A 空白管,W:样本鲜重。

 
1.5  可溶性蛋白含量测定方法 
 
使用湖南天根生化科技有限公司提供的 Bradford 蛋白质定量试剂盒,用微量法测定薰衣草叶片可溶性糖含量,使用仪器为:离心机、酶标仪、制冰机。 
 
可溶性蛋白的提取:称取 0.1g 薰衣草叶片样品,加入 5m LPBS 缓冲液冰浴研磨提取,8000g,4℃离心 10min,其上清液即为可溶性蛋白提取液。 
 
样品的测定: 
 
(1)将 0、1、2、3、4、5、6μL 牛血清蛋白标准溶液(1mg/ml)分别加入到酶标板中,加 PBS 补足到 15μL。 
 
(2)将 4μL 的样品加入到酶标板,并用 PBS 补足到 15μL。 
 
(3)向各试管中加入 285μL 考马斯蓝染液,混匀,室温放置 5min。 
 
 (4)用酶标仪测定 595nm 处的样品浓度。 
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