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瓢唇兰属植物怎么组织培养的3个方法

日期:2020-08-11 15:19:33     浏览:4    
核心提示:除用无菌播种外,可从健壮母株假鳞茎上采集嫩芽作为外植体快速繁殖,以采取长5cm左右的嫩芽,从假鳞茎着生基部切下,用自来水冲洗干净后,在无菌室内进行外植消毒
组织培养
 
除用无菌播种外,可从健壮母株假鳞茎上采集嫩芽作为外植体快速繁殖,以采取长5cm左右的嫩芽,从假鳞茎着生基部切下,用自来水冲洗干净后,在无菌室内进行外植消毒,把外植体浸入1%的次氯酸钠溶液中灭菌10~15分钟,然后用灭菌蒸馏水彻底冲洗。
 
在无菌超级工作台上放解剖镜下,剥去外层几片,并切取完整的芽尖,芽尖大小以2~4mm的小块,接种到配制好的培养基中。茎尖诱导可用MS、VW改良培养基,可参考无菌播种原球茎诱导培养部分。通常前几代培养1~2周转接1次,以后每3~4周转接1次,大约30~50天会形原球茎。

瓢唇兰属植物怎么组织培养的3个方法
 
原球茎的增殖培养,可采用诱导培养,并对其激素进行适当调整,如降低BA的用量,适当添加一些香蕉泥、苹果汁等辅助成分。当原球茎的增殖达到一定数量后,可转入不加任何激素的MS等培养基中培养,让其原球茎分化出小芽,然后经过壮苗培养,再放置在生根培养基上进行生根培养。
 
也可采用根尖作为外植体培养,以根尖段长约0.5cm,取自4个月龄(6~8cm高)的瓢唇兰幼苗(取自种子萌发的实生苗中获得)。接种前用20%商用漂白剂(1%有效氯)对外植体进行消毒20分钟,然后用无菌蒸馏水冲洗2次。以采用60g/L香蕉汁、1g/L活性炭、0.8%琼脂和27.8mg/L的Fe-EDTA代替硫酸铁,对Knudson改良培养基进行改性,以pH值5.8为好,培养温度26℃±2℃,并在荧光灯以40μmolm2/s的光照射,光照时间为每天16小时。
 
若采用MS(大量元素减半)培养基,不仅形成了原球茎,而且长成了幼苗。生长素以IAA、IBA和2,4-D及细胞分裂素BA,在加入生长调节后,将培养基分配到125ml的锥形瓶中烧瓶,120℃蒸压15分钟。烧瓶用穿孔橡胶塞密封。其中生长素以使用2,4-D为最佳,而用KT10mg/L+NAA5mg/L诱导效果也较佳,70%的根芽可形成原球茎,继续培养6个月可育成小苗。如果在原球茎进行大量增殖,可参考上述培养基。

瓢唇兰属植物怎么组织培养的3个方法
 
生根培养后,从培养皿中取出长2~3cm的生根幼苗,用自来水冲洗,然后转移到透明的矩形塑料容器(高10cm×宽19cm×长29cm)中,培养基以椰子纤维和泥炭藓(1︰0.1︰1或2︰1)作为盆栽混合物,并保持25℃的室温,每天喷洒清水,持续1个月。
 
随后,容器半开,喷雾状态保持在30天内(第一个驯化阶段)。之后,植株转移到单个圆形塑料盆(高7cm×基部直径6cm,底部有孔)中,盆中培养基以泥炭基质与珍珠岩(2︰1)的混合物,每天喷洒足量的水以保持混合物湿润(第2个驯化阶段)。花盆在温室中约60天后,保持有75%的太阳辐射通量,以促幼茎的增厚。
 
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